Định Mệnh Ánh Trăng là bộ phim xuyên không, tình cảm, lãng mạn, hành động của Thái Lan xoay quanh nữ cảnh sát Opol ở thời hiện đại và Duangkaew (Namtarn Pichukkana) một cô gái sống ở thời đại Ayutthaya. Cả hai có gương mặt giống hệt nhau nhưng tính cách hoàn toàn trái ngược. Opol thì mạnh mẽ và tomboy, còn Duangkaew thì dịu dàng và thục nữ. Vì một bức tranh bí ẩn, Opol bị xuyên không đến thời đại Ayutthaya, còn Duangkaew thì xuyên không đến thời hiện đại. Tại đây, cả hai đối diện với vô số rắc rối vì khác biệt thời đại và tính cách. Ở bên Duangkaew luôn có anh chàng đồng nghiệp của Opol là PeePope giúp đỡ và Opol thì nên duyên với anh chàng thái y Luang Osotwonwet.